作者：小小鱼虾
邓勇教授的号越来越难挂，一年前转来了自己这边，反正也是老相识。
认识袁威宏，且知道周三门诊，所以老早就提前挂号。
“刘伯，我练小号，这是我学生，方医生。让他给你瞧瞧。”袁威宏扭着腰，没有坐看诊位。
老爷子一个人来的，精神硬朗，看了看方子业：“哦，就是袁医生伱以前跟着楚教授那样是吧？”
“那行。”叫刘伯的人还非常懂行。
方子业其实对练小号三个字有点抵触，毕竟这一边形容的是生儿子。可话出袁威宏之口，恩师如父，方子业也只能吸了吸鼻子。
“您好，老爷子，您这边是什么情况啊？”方子业挤出笑脸，这么问。
给老病友看病可比新病人更加麻烦，需要对既往的病史等一一罗列，才能知道他目前的情况。
可刘伯却是很个性的直接把病历袋往桌子上一砸：“喏，就这些，劳烦方医生您给看看。”
袁威宏的眼睛瞬间一挑，差点就没给刘伯点个赞。
“您是之前做过手术呀？”方子业当即轻声细语起来。
这样的老病友，复查多年，他自己的情况，估计自己早已经了然于心，久病成医可能有点夸张，但半专业绝对不假。
这要是没说对，对方准能把自己揪出来。
“嗯，做了好几年了。”刘伯回答得相当谨慎，但没继续谈下去的欲望，仿佛是为了考方子业而故意搪塞。
满脸含笑，仿佛在说，你老师都是我看着成长起来的，这不又来一个小伙子？
方子业就只能是从一开始的平片、CT等开始查看，并且还把他好多年前的出院记录、门诊病历，都详细地搞明白后，这才晓得。
原来几年前，老爷子是因为车祸伤导致了胫骨平台的粉碎性骨折，而且还有骨缺损，这才转来中南医院，找了楚教授做了手术。
术后持续性复查了多年，一直都还不错，如今估计又是来照一个平片，主要是观察骨质疏松的情况以及创伤性关节炎的进展度。
“老爷子，您现在，这只脚的关节，痛不痛啊？从您术后复查照的片子来看，您之前的骨折，已经愈合了，对您的行走，肯定没负担。”
“不过从前年开始，您的胫骨平台下方的骨质有点偏移，您这段时间是干啥了？”方子业用随和的语气，问了两个问题。
看似口水话，其实就是问现在症状，以及近年来的活动习惯，为什么会出现这样的改变。
“现在隐隐有点痛。”
“方医生，您觉得我这两年是干啥了？”刘伯这么回，有点老顽童的气势。
“可能是负重，也可能是其他原因，反正最近两年，您的这膝关节下啊，因为微骨折导致了下肢负重偏移，有可能是下地？”
“或者是负重了？”方子业又不是算命的。
但也猜了个八九不离十。
“下地没下，就是大胖小子有点重。舍不得放开，我这个没问题吧？现在那小子也能跑了。”刘伯满脸幸福样儿，仿佛隔着不知道多远，都能感受到他正沉沦于儿孙绕膝的天伦之乐中。
方子业瞬间恍然大悟。
“还好，从去年的平片上看的话，目前主要是胫骨平台的内外侧骨质不够均匀，骨质疏松是一个原因，抱孙子耍也是另外一个原因，不过还是要注意。”
“如果继续这么偏移的话，你这个创伤性关节炎会加重欸，创伤性关节炎，骨折之后，多多少少会有一些，年纪大了，也会有一定的磨损，如果疼痛得不是很厉害的话，多休息，做一些有氧运动，才是合适您这个年纪的抉择。”方子业如此一边记录着，一边建议。
“嗯，现在孙子开始锁幼儿园里，没得抱咯。方医生你看我今天，要不要做个检查，开点药啥的……”刘伯问。
方子业记录完，就说：“我先做个体格检查，您躺在检查床上一下，头朝这边。”
方子业说着缓慢站起身……
大概五分钟后，刘伯一边拿着自己的片子袋，一边拿着病历本和检查单往外走，对袁威宏说：“袁医生，你这个徒弟也不错，你这个楚教授的徒弟也不错。”
排比句式都用上了，而且还竖起了大拇指。
“谢谢刘伯。您还是老样子，拍完片子就上来，不用等结果，看完了把片子打印出来拿回去就可以。”袁威宏伸手示意他可以先去检查了。
刘伯就点头走了。
方子业就赶紧把位置让了开，这一个老病人进来自己蹭一下倒是可以，如果更多的人来，那还是不好交差，也不是每个人都能这么大度地让自己练手。
袁威宏则面色严肃，一边坐下，一边问：“你刚刚所说的，创伤性关节炎一旦骨折就会发生，从哪里听来的？看的文献？”
“嗯，最近在看一些文献，前段时间正好看到过。”方子业回，然后准备往外面去喊病人。
“书也看了不少吧？这个病人，如果是你看门诊，你该怎么对他用药？”袁威宏继续问。
方子业仔细审视了几秒钟，先顿步，右手拉着门把手，做接病人状，但没打开门：“看老爷子目前的情况，还是建议他先进行功能锻炼，不常规治疗性用药。”
“那疼痛呢？”袁威宏穷追不舍问。
“师父，我觉得他这个膝关节的疼痛，并不是因关节炎引起的，可能就是近期的活动性损伤吧。刚刚刘伯不是说了嘛，他本来是要过年前来复查的，前段时间跟着孙子跑，绊了一下，这才提前来。”
“没摔倒，估计是股四头肌牵拉的非骨性损伤。”方子业回。
“理论不错。”
“快成长起来了。”袁威宏用右手的拇指摸了摸下巴，看向方子业的目光，仿佛真像是看个小号。
方子业则是顺手拉开了门，对外喊：“2号病友在吗？2号…”
第54章 努力地挣扎（求收藏，求追读）
“你更喜欢临床？”门诊即将结束时，袁威宏看着方子业脸上笑容绽放得比任何时候都开心，便如此问。
三年来，袁威宏几乎很少看到过自己的学生会这么开心。
方子业看着自己刚提升了创伤外科基础理论后，学识点余额再次攀升到22.1！
转头说：“师父，临床和科研我都喜欢，我其实喜欢对未知探索的过程。”
心里默默说，本来这样探索过程中带来的学识点，才是最让我开心的。可久而久之，我发现这个过程，其实也是一种享受。
“晚上你还要去实验室吧？我就不叫你出去吃饭了。”袁威宏看了看手表上的时间，指向了十七点整，距离下班还有半小时。
“嗯，师父，洛师妹transwell小室实验，今天还要去看一下孵养状态。”方子业点了点头，同时侧身往外再看了一眼，确定暂时没有复诊病人在外候着，这才稍稍把门推了一下。
如此更方便说话。
未下班之前的门诊日清闲时间，其实也是值得享受的。
方子业就给袁威宏的一次性茶水杯里，再接了一杯热水。
“上次那种枞树菌，还能搞得到吗？我可以买一点。”袁威宏忽然这么问了一嘴。
“啊？这个季节已经过时了，十月初，是最后一批，现在很难找了，不过我可以帮您问问，师父。”方子业眼皮快速地闪动了几下。
按理说，老师有想吃的东西，这么好的老师，想方设法也得帮个忙。
只是过季节的山货，这还真不是想办法就能搞得到的，若是那种冰冻的，估计口味又没那么好。
“过了就算了，别费神了，我只是随口一问。别往心里去。”
“伱更要上心的事情是好好帮着听竹把申请课题的前期研究做好，她属于是非名额内的博士研究生，邓勇教授一开始不同意她来就读，是因为着实课题基金有限。”
“邓勇教授本来收了的学生，再加上新来的博士研究生，肯定要保证他们先毕业，洛听竹如果想要多拿到基金做课题的话，就得她自己稍微努力一下了。”
“这是没办法的事情。其实她如果待内科，挺好的。”袁威宏转移了话题。
方子业则笑着说：“洛师妹可能是看上了我们骨科老师们的强悍肌肉，才来了我们创伤外科。”
袁威宏闻言一怔。
接着恍惚地摸了摸手表，叹了一口气：“如果原生家庭一般的孩子，有时候美貌不是幸运，还是一种原罪。”
“这就是生活啊，一地鸡毛。”
这个话题太过惆怅，方子业很难感同身受，他自己的家庭，是相对幸福的。如今父母还愿意每个月支援两千左右的生活费。
“哦，对了，子业，你如果细胞实验技术操作都比较好的话，所有的实验流程都可以一次到两次就能解决，我们经费本上，是可以节省腾挪出来一丢丢，给你和揭翰两个人，发点劳务费的。”袁威宏对方子业眨了眨眼睛。
方子业若有所思，眼珠子转了一圈。
不管是任何课题资金，给硕士研究生发一丢丢，比如说三五千的劳务费，是正常，合法、合理、合规的支出。
只是一般的经费本，不会多出来这一笔闲钱。毕竟不是每个人的每个实验流程，都可以一步到位。
是需要好几次才能够成功的，除非是熟练度非常高。
但，方子业觉得自己是有那么一丢丢可能多节省一点实验耗材费用的，如此一来，倒还真有可能一年拿个两三千的劳务费。
只是，这样一横向对比，真的是旱的旱死，涝的涝死了。
“谢谢师父。”方子业也不富裕，就不敢有多余想法了。
袁威宏则摆了摆头：“嗯！”
“经费要好好用，精打细算，该节省的地方可以节省，但不该节省的，千万不能省，严格保证无菌原则，移液管虽然贵，但该用就用，保证实验流程的严谨性。”
“省钱不是这么省的，最主要的是要把这个课题的结果做出来，稍微推动一丢丢科学的门缝儿，这就是我们拿着国家给的钱，该做的事情。”
“还有就是，揭翰如今的科研底蕴非常深厚，他申请市级、校级课题起来，与你的底蕴也都差不多，所以他后续啊，也可能会为我们团队多拿一点钱。”
“一个是课题经费，一个是课题数量，这都是好东西。”
“有钱才能好做事。”袁威宏与方子业说着，不能对外道的话。
……
门诊结束，方子业并未多耽搁，帮忙袁威宏放了白大褂后，就直接去了实验室里。
邓勇教授那边的团队虽然大，但洛听竹并不特殊，所以她没有做实验的经费，需要自己去努力，前期研究，既然求到了袁威宏这里，袁威宏还应下来了。
那么方子业作为袁威宏团队里的成员，能帮忙自然要尽量帮忙，否则的话，袁威宏也要亲自来实验室。
而，方子业来到实验室里的时候，就发现，洛听竹一直就守在实验室，从下午的两点一直到下午的六点。
比任何人都要担心实验的进度。
她做申请课题的前期实验的经费都不多，因此容不得丝毫的浪费和大意。
“方师兄，我觉得这个培养皿已经差不多可以计数了，您来看一下？”洛听竹在看到方子业到后，赶紧站起，同时把无菌检查手套、一次性套装口罩等，都已经给方子业备好。
“嗯，好，吃饭了吗？”
“我们要不先点一个外卖？”方子业进来之后，一边问。
“已经点了的，师兄。”洛听竹点头，表示自己的后勤工作做得非常到位。一心只想着细胞宝宝以及实验。
transwell实验后，就是要进行细胞计数，以客观的数据来表示肿瘤细胞的侵袭能力。
因是前期实验，因此只需要用直接计数法即可。
然后，即便是直接计数法，仍需要一定的实验步骤，才能相对客观反应——
先固定好细胞，不再让其移动。
用镊子小心取出小室，吸干上室培养基，用棉签轻轻擦拭Matrigel和上室内的细胞。取新的24孔板加入4%多聚甲醛600μL，将小室放入后固定20-30min。
然后再进行细胞染色！
取出小室，吸干上室固定液，移到预先加入约800μl 0.1%-0.2%结晶紫的孔中染液的孔中，染色15-30min。除去未与细胞结合的结晶紫，用棉签轻轻擦拭小室的上侧，将非特异性结合于小室上表面的染料擦掉，以便后续镜检计数……
这一步，方子业非常期待，因为不管是别人的细胞实验，还是自己的，只要自己发现了，而且参与了实验，肯定就有学识点的收益！
两人转战到显微镜前…
*注：本文中涉及到的一些实验步骤，一部分是经简化版本，主要是完全一股脑地放上来，懂的人倒是看懂了，大部分人都没看懂，考虑到大部分书友的感受，大家看个大概即可。
总结：transwell实验是检测肿瘤细胞侵袭能力的，通过技术表示侵袭能力强弱，操作不算简单，但是一种证明能力的工具。
第55章 小爬虫（求收藏，求追读）
镜下，透过膜侵袭而下的细胞数量还算喜人。
再对标正常组的话，数量占据了一定优势，已经染色，可以看得出洛听竹处理过的细胞的侵袭性比正常组更强。
这样的现象，代表着洛听竹处理过的细胞宝宝，比正常的细胞宝宝，更具有攻击性。
“学识点+28.6！”
巨额学识点增加闪现时，让方子业颇觉惊愕同时，又感觉是在情理之中。
目前虽然只是前期实验，未成系统性课题，但也是新的方向，也代表着一种突破性的认证新知。
“洛师妹，你的前期实验，就只会做到transwell这一步吧？”
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